DHSS双鞘流技术是HORIBA Medical的专利技术。它的原理是流式细胞技术结合细胞化学全染色技术、光学分析技术、鞘流阻抗法三种方法对白细胞分类和血小板进行精确分析。双鞘流系统技术是为流式细胞仪提供准确结果的一门技术。DHSS有助于血液分析的专业化。
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1. 每个细胞依次通过鞘流微孔，（图1中的①），通过电流（阻抗的变化）进行细胞计数和细胞体积的测量。这就是细胞体积的电阻抗测量方法。
2. 光束以0°的方向（图1中的➁），测定细胞内结构的复杂性。
• 部分光线被细胞内容物所吸收
• 大部分的光线被细胞的结构所偏移（散射光）
• 剩下的部分透过细胞
HORIBA Medical分析仪使用光学测量和电阻抗相结合的方法分析和计数通过鞘流微孔的细胞，然后用电极脉冲计数细胞的数量，测量WBC、RBC、PLT的大小及分布情况。
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LMNE检测原理
HORIBA Medical专用试剂Nucediff溶解红细胞、稳定白细胞形态，然后测量每个细胞内部结构和电阻率（体积），从而实现有核细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、非典型淋巴细胞、未成熟细胞、成熟红细胞的分类。
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LMNE分类检测的原理基于双鞘流系统DHSS流式细胞术，检测每个通过该系统的细胞的两个特性：体积和吸光度。
散点图和细胞的描述
Figure 3: 1= Lymphocytes 2= Monocytes 3= Neutrophils 4= Eosinophils 5= IML (Immature Lymphocytic cells) 6= IMM (Immature Monocytic cells) 7= IMG (Immature Granulocytic cells) 8= Erythroblasts or Platelet aggregates 9= Background Noise Low 10= Background Noise High
通过测量得出的白细胞的吸光度和电阻抗，仪器可给出一个矩阵分类散点图，其中X轴为细胞体积，Y轴为吸光度，通过散点图可以清楚区分白细胞群。
细胞群阀值(其中一些是浮动的其他事固定的)对正常的白细胞形态设定了正常的限值。特定细胞群的形态改变会显示在矩阵图上，表现为相应细胞群位置的偏移。
图3中可以看到，固定阀值以蓝色显示、浮动阀值以红色显示。在调整矩阵后，黑色阀值跟随红色阀值。根据次矩阵图计算得出白细胞群的百分比。
有核红细胞 (NRBC)
有核红细胞是带细胞核的未成熟红细胞。在Nucediff溶解细胞膜后，流式细胞仪检测到有核红细胞释放出的细胞核。因为它们体积小，吸光度低，所以会位于散点图中淋巴细胞群的左侧（图三的#8）。在此区域，还可以看到血小板聚集，而通过特定的算法，可区分它们与有核红细胞。在所有情况下，NRBC和血小板聚集不包括在白细胞计数中。
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关于DHSS的细胞形态：
在HORIBA Medical分析仪中，激光测量是一种低相干光源。低相干光源的特点是光束的光谱和空间分布不同。这种测量一方面反映了不同细胞的形态，另一方面反映了细胞质内部的特征。散射光反应了细胞的大小。
光束在这种位置测量细胞不太敏感（图4），可以根据细胞的固有特征去判断。
低相干光源:
在使用低空间相干光束（发散光束）的多色光中，测量对光束的方向不太敏感。
为什么是低相干光而不是激光？
鉴于白细胞形态和结构的复杂性，结合细胞化学和低相干光测量的识别和计数方法更具有鉴别性和针对性。
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| 激光 | 低相干光源 | |
| 优势 | 流式细胞中的高功率（90%的光源） 适合荧光 | 光强度平坦 低噪音 |
| 限制 | 限制嘈杂的光 难以用于精确的体积测量 | 效率低（0.0004%） 不适合荧光 |
用Yumizen血液分析仪进行测量，可以对细胞的体积、核质比和细胞内部结构进行更准确的分析。
光学血小板的分析
与WBC的分析类似，在PLT -O模式下，血小板计数采用双鞘流系统技术，根据折光指数区分PLT和红细胞，测定原理与LMNE相似。
1. 稀释后，溶液在测量计数池中进行分析前，通过抽吸从计数池转移到光具座。在双鞘流作用下穿过LMNE检测孔。测量每个细胞的电阻率（体积）和吸光度（细胞化学）。
2. 通过测量，绘制出一个矩阵，X轴代表体积，Y轴代表吸光度。
Figure 6: PLTOx matrix representations
光学血小板：
光学血小板模式下同时可以鉴定RBC百分比，并且仪器会运行PLT/RBC低值计数模式。
DHSS如何保证分析的准确性？
流体动力利用鞘流控制微孔内样品的速率，并引导样品沿着中心轴流动。HORIBA医学双鞘流系统避免了边缘效应导致的结果改变。
什么是边缘效应？
电场附近的电梯度比中心更强，会影响精度，会扭曲电脉冲的大小，导致对粒子大小的估计过高。当粒子在不同位置通过微孔时，就会发生这种情况。导致情况更加复杂。
使用 DHSS 可避免光圈系统许多潜在问题。样本流被护套液包围，因为它通过光圈的中轴线。拉米纳尔流允许中央样本流足够窄，以分离和对齐细胞到单个文件通过传感区。外护套液可消除细胞再循环回传感区。待测样本的细胞悬液在鞘液的包围和约束下，将细胞排成单列一个一个地通过流动室，使细胞通过检测区。
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