什麼是 A-TEEM
了解 A-TEEM 光譜是什麼以及它與傳統的激發發射矩陣 (EEM) 有何不同。
A-TEEM™ 代表同時吸收、透射和螢光激發發射矩陣 (EEM) 擷取。它是一種新穎、穩健且極為靈敏的分析技術。 A-TEEM 具有分子光譜(速度、每次測量的低成本以及實驗室到生產線的放置)和色譜(靈敏度、選擇性、低檢測和定量限)的最佳屬性。
HORIBA 的 A-TEEM Compliance Package 提供記錄保存、方法驗證和儀器驗證的解決方案,以滿足監管要求。
這個名稱本身反映了這種二合一方法所結合的兩種技術:
A-TEEM特點:
1.由於同時收集 UV-Vis/NIR 吸光度資料來校正內部濾光效應 (IFE),因此可產生與濃度無關的 A-TEEM 分子指紋圖譜,從而實現定量分析
2.同時表徵螢光和非螢光化合物使 A-TEEM 分子指紋圖譜具有無與倫比的定性篩選選擇性
3.極快的資料收集意味著 A-TEEM 可用於即時製程分析和製程控制 Q/A 和 Q/C。
與大多數基於分離的方法相比,A-TEEM 是一種綠色技術,可促進永續性。然而,A-TEEM 在複雜基質的定量方面可與色譜法相媲美。由於其速度快且每次測量成本低,它已取代食品和製藥領域常規測量的標準分離方法。
與 EEM 同時收集的 UV/Vis 吸光度數據可對 IFE 進行校正,從而產生與濃度無關的 A-TEEM 配置文件,並在更廣泛的濃度範圍(通常高達約 2 個吸光度單位)內提供線性度。與從傳統掃描螢光計收集的 EEM 不同,這些 A-TEEM 分子指紋與濃度無關,並且為使用 A-TEEM 進行常規定量分析打開了大門,正如食品和製藥領域所證明的那樣。
HORIBA 專有的 A-TEEM 技術可以同時採集三種模式:螢光 EEM、多組分分析的吸光度測量以及 CIE 比色法的透射測量。
同時採集 3 種模式 – 蔓越莓萃取物
這三種模式可確定五個單獨的特徵,這些特徵共同創建了獨特的、高選擇性且與濃度無關的 A-TEEM 指紋,可用於篩選和分類。
A-TEEM 捕捉高度相似化合物的分子結構的細微變化,從而產生獨特的與濃度無關的分子指紋,可用於識別和量化樣品成分。透過 A-TEEM 結合多變量分析,可以在幾秒鐘內快速解析甲酚異構體。
A-TEEM 在環境水研究方面擁有廣泛而成功的分析歷史,具有許多應用,包括測量有色溶解有機物 (CDOM)、水中油分析,以及美國測試與材料協會 (ASTM) 方法苯、甲苯、乙苯和二甲苯(BTEX)。
A-TEEM 特別適合複雜生物分子的辨識和定量。芳香族氨基酸可以透過獨特的 A-TEEM 指紋輕鬆區分,並且對當地環境高度敏感。因此,A-TEEM 可用於含有酪胺酸、色氨酸和苯丙胺酸的蛋白質的特性和定量。例如,二級結構或與 DNA 相互作用的細微變化反映在 A-TEEM 分子指紋的變化中。 與拉曼、NIR 或 FT-IR 等其他光譜技術不同,A-TEEM 對水和單醣不敏感,使其能夠處理非常低濃度的製劑(如許多疫苗)。
A-TEEM 已用於區分多組分疫苗,根據胺基酸取代、翻譯後修飾和聚集狀態對疫苗化合物進行分類。除了提供 AAV 空滿比的定量模型外,A-TEEM 還能夠區分 AAV 血清型。此外,還使用 A-TEEM 區分了來自不同癌細胞的外泌體。
A-TEEM 已用於確定基礎和補料培養基的品質、監測生物過程以及反應監測。
A-TEEM 非常適合複雜基質中組合成分的定量和定性分析。對生物製藥和天然產物重要的分子(蛋白質、輔酶、維生素、細菌污染的產物等)可以被識別和定量,而像水和單醣這樣不具有天然螢光的分子則不能被識別和定量。
A-TEEM 對代謝物(NADH、NAD(P)H)、維生素、有色成分、水解產物、聚集物和黴菌毒素也敏感。
其中許多樣品對於色譜和振動光譜具有挑戰性,但可以使用 A-TEEM 進行分析,只需最少的樣品製備,溶劑和其他消耗品的使用量很少。
A-TEEM 已用於對許多不同的目標分析物進行定量分析,追蹤葡萄酒中的成分,並以1 分鐘的測量代替10 小時的品質分析,作為油產品新鮮度的衡量標準,檢測穀物中的黴菌,以及檢測多種天然產品中經濟摻假的證據。
與傳統的色譜方法相比,A-TEEM 能夠以最少的樣品製備顯著減少測量時間。 A-TEEM 克服了與色譜法(HPLC、LC-MS、GC、GC-MS)相關的許多弱點::
A-TEEM 優於色譜法
測量成本低
快速數據收集——幾秒鐘,而不是幾分鐘
永續/綠色方法—無溶劑、不產生廢棄物不須再處理
A-TEEM 與色譜法有以下共同優點:
與振動光譜相比,A-TEEM 極其靈敏和特異,能夠對 ppb 範圍內的樣品進行定量和定性測量,比典型振動光譜低幾個數量級。 A-TEEM 克服了與振動光譜(拉曼、FT-IR、NIR)相關的許多弱點:
A-TEEM 相對於振動光譜的優勢
A-TEEM 具有共同的優勢,使振動光譜成為製程分析的主要分析感測器:
與傳統的 EEM 相比,A-TEEM 技術提供了更好的分子特異性,因此更適合定量和定性分析應用的化學計量分析。 A-TEEM 克服了傳統 EEM 的主要限制:
傳統的掃描分光螢光計以激發發射矩陣 (EEM) 的形式收集 3D 螢光,即螢光強度隨激發波長和發射波長變化的輪廓。許多已發表的科學論文都引用了掃描分光螢光計在食品、水和製藥中進行螢光 EEM 成分分析的用途。
傳統掃描 PMT 螢光計存在根本限制:
掃描螢光分光光度計上的單一 EEM 實驗可能需要長達一小時才能收集數據。
螢光 EEM 指紋的形狀隨著樣品濃度的變化而變化,進而影響定量預測的結果。
僅有表徵螢光成分
HORIBA 的 A-TEEM 方法克服了這三個限制。使用CCD偵測器,可以在幾秒鐘內取得完整的螢光EEM,解決了測量速度慢的問題。為了解決定量建模問題,使用同時檢測到的吸收光譜來校正 IFE,從而產生 ppb 範圍內 LoQ 的濃度無關的 A-TEEM 分子指紋。此吸光度和透射率數據也可用於樣品表徵,從而能夠顯示非螢光化合物。
此處介紹的 Aqualog A-TEEM 化學計量學分析源自 Eigenvector Research Incorporated 的 軟體。
Aqualog A-TEEM Autosampler Accessory
Automated Organic Analysis & Early Warning Sentinel
Fluorescence and Absorbance Spectrometer
The Gold Standard for Water CDOM Research
如您有任何疑問,请在此留下詳細需求或問題,我們將竭誠您服務。