Fluorescence

A-TEEM 光譜

A-TEEM™ 代表同時吸收、透射和螢光激發發射矩陣 (EEM) 擷取。它是一種新穎、穩健且極為靈敏的分析技術。 A-TEEM 具有分子光譜(速度、每次測量的低成本以及實驗室到生產線的放置)和色譜(靈敏度、選擇性、低檢測和定量限)的最佳屬性。

HORIBA 的  A-TEEM Compliance Package 提供記錄保存、方法驗證和儀器驗證的解決方案,以滿足監管要求。

什麼是 A-TEEM

A-TEEM Spectroscopy

了解 A-TEEM 光譜是什麼以及它與傳統的激發發射矩陣 (EEM) 有何不同。

應用

Applications

了解 A-TEEM 分子指紋圖譜可以使用哪些應用程式。

產品

了解哪些 HORIBA 產品可進行 A-TEEM 光譜分析。

網路研討會和視頻

觀看我們的點播網路研討會並觀看我們的 A-TEEM 影片。

案例研究和出版物

閱讀展示 A-TEEM 實際應用的出版物和案例研究。

下載

Downloads

下載 A-TEEM 電子書和其他描述 A-TEEM 的手冊。

什麼是 A-TEEM?

A-TEEM方法

這個名稱本身反映了這種二合一方法所結合的兩種技術:

  • Absorbance-透過率代表其 UV/Vis/NIR 能力
  • Excitation-Emission Matrix 代表多維螢光能力

 

A-TEEM特點:

1.由於同時收集 UV-Vis/NIR 吸光度資料來校正內部濾光效應 (IFE),因此可產生與濃度無關的 A-TEEM 分子指紋圖譜,從而實現定量分析

2.同時表徵螢光和非螢光化合物使 A-TEEM 分子指紋圖譜具有無與倫比的定性篩選選擇性

3.極快的資料收集意味著 A-TEEM 可用於即時製程分析和製程控制 Q/A 和 Q/C。

 

 

與大多數基於分離的方法相比,A-TEEM 是一種綠色技術,可促進永續性。然而,A-TEEM 在複雜基質的定量方面可與色譜法相媲美。由於其速度快且每次測量成本低,它已取代食品和製藥領域常規測量的標準分離方法。

A-TEEM 用於定量分析

與 EEM 同時收集的 UV/Vis 吸光度數據可對 IFE 進行校正,從而產生與濃度無關的 A-TEEM 配置文件,並在更廣泛的濃度範圍(通常高達約 2 個吸光度單位)內提供線性度。與從傳統掃描螢光計收集的 EEM 不同,這些 A-TEEM 分子指紋與濃度無關,並且為使用 A-TEEM 進行常規定量分析打開了大門,正如食品和製藥領域所證明的那樣。

A-TEEM 用於篩選和分類

HORIBA 專有的 A-TEEM 技術可以同時採集三種模式:螢光 EEM、多組分分析的吸光度測量以及 CIE 比色法的透射測量。

同時採集 3 種模式 – 蔓越莓萃取物

這三種模式可確定五個單獨的特徵,這些特徵共同創建了獨特的、高選擇性且與濃度無關的 A-TEEM 指紋,可用於篩選和分類。

A-TEEM 適用於單分子 - 異構體

A-TEEM 捕捉高度相似化合物的分子結構的細微變化,從而產生獨特的與濃度無關的分子指紋,可用於識別和量化樣品成分。透過 A-TEEM 結合多變量分析,可以在幾秒鐘內快速解析甲酚異構體。

A-TEEM 用於 水

A-TEEM 在環境水研究方面擁有廣泛而成功的分析歷史,具有許多應用,包括測量有色溶解有機物 (CDOM)、水中油分析,以及美國測試與材料協會 (ASTM) 方法苯、甲苯、乙苯和二甲苯(BTEX)。

A-TEEM 對於生物分子

A-TEEM 特別適合複雜生物分子的辨識和定量。芳香族氨基酸可以透過獨特的 A-TEEM 指紋輕鬆區分,並且對當地環境高度敏感。因此,A-TEEM 可用於含有酪胺酸、色氨酸和苯丙胺酸的蛋白質的特性和定量。例如,二級結構或與 DNA 相互作用的細微變化反映在 A-TEEM 分子指紋的變化中。 與拉曼、NIR 或 FT-IR 等其他光譜技術不同,A-TEEM 對水和單醣不敏感,使其能夠處理非常低濃度的製劑(如許多疫苗)。

A-TEEM 已用於區分多組分疫苗,根據胺基酸取代、翻譯後修飾和聚集狀態對疫苗化合物進行分類。除了提供 AAV 空滿比的定量模型外,A-TEEM 還能夠區分 AAV 血清型。此外,還使用 A-TEEM 區分了來自不同癌細胞的外泌體。

A-TEEM 已用於確定基礎和補料培養基的品質、監測生物過程以及反應監測。

A-TEEM 對於複雜矩陣

A-TEEM 非常適合複雜基質中組合成分的定量和定性分析。對生物製藥和天然產物重要的分子(蛋白質、輔酶、維生素、細菌污染的產物等)可以被識別和定量,而像水和單醣這樣不具有天然螢光的分子則不能被識別和定量。 

A-TEEM 對代謝物(NADH、NAD(P)H)、維生素、有色成分、水解產物、聚集物和黴菌毒素也敏感。

其中許多樣品對於色譜和振動光譜具有挑戰性,但可以使用 A-TEEM 進行分析,只需最少的樣品製備,溶劑和其他消耗品的使用量很少。

A-TEEM 用於食品和飲料

A-TEEM 已用於對許多不同的目標分析物進行定量分析,追蹤葡萄酒中的成分,並以1 分鐘的測量代替10 小時的品質分析,作為油產品新鮮度的衡量標準,檢測穀物中的黴菌,以及檢測多種天然產品中經濟摻假的證據。

A-TEEM 色譜法

與傳統的色譜方法相比,A-TEEM 能夠以最少的樣品製備顯著減少測量時間。 A-TEEM 克服了與色譜法(HPLC、LC-MS、GC、GC-MS)相關的許多弱點::

A-TEEM 優於色譜法

  • 測量成本低

  • 快速數據收集——幾秒鐘,而不是幾分鐘

  • 永續/綠色方法—無溶劑、不產生廢棄物不須再處理

  • 可使用用於流程分析

 

A-TEEM 與色譜法有以下共同優點:

  •  檢測極限低
  •  重複性高
  •  再現性強
A-TEEM Versus Chromatography

A-TEEM 與振動光譜學

與振動光譜相比,A-TEEM 極其靈敏和特異,能夠對 ppb 範圍內的樣品進行定量和定性測量,比典型振動光譜低幾個數量級。 A-TEEM 克服了與振動光譜(拉曼、FT-IR、NIR)相關的許多弱點:

A-TEEM 相對於振動光譜的優勢

  • 檢測和定量的限制低
  • 靈敏度高
  • 選擇性多

 

A-TEEM 具有共同的優勢,使振動光譜成為製程分析的主要分析感測器:

  • 每次測量成本低
  • 快速數據收集——幾秒鐘,而不是幾分鐘
  • 可使用於流程分析
A-TEEM Versus Vibrational Spectroscopy

A-TEEM 與傳統 EEM 的比較

與傳統的 EEM 相比,A-TEEM 技術提供了更好的分子特異性,因此更適合定量和定性分析應用的化學計量分析。 A-TEEM 克服了傳統 EEM 的主要限制:

  • 數據採集速度顯著加快
  • 由於濃度效應(內過濾效應)的即時校正,產生與濃度無關的分子指紋
  • 同時採集吸光度以表徵非螢光物質、消光係數和顏色表徵

 

傳統的掃描分光螢光計以激發發射矩陣 (EEM) 的形式收集 3D 螢光,即螢光強度隨激發波長和發射波長變化的輪廓。許多已發表的科學論文都引用了掃描分光螢光計在食品、水和製藥中進行螢光 EEM 成分分析的用途。

傳統掃描 PMT 螢光計存在根本限制:

  • 掃描螢光分光光度計上的單一 EEM 實驗可能需要長達一小時才能收集數據。

  • 螢光 EEM 指紋的形狀隨著樣品濃度的變化而變化,進而影響定量預測的結果。

  • 僅有表徵螢光成分

 

HORIBA 的 A-TEEM 方法克服了這三個限制。使用CCD偵測器,可以在幾秒鐘內取得完整的螢光EEM,解決了測量速度慢的問題。為了解決定量建模問題,使用同時檢測到的吸收光譜來校正 IFE,從而產生 ppb 範圍內 LoQ 的濃度無關的 A-TEEM 分子指紋。此吸光度和透射率數據也可用於樣品表徵,從而能夠顯示非螢光化合物。

Three dimensional contour plot viewed at an angle of fluorescence EEM

Figure 1. Three-dimensional contour plot viewed at an angle of a fluorescence EEM, with a three-dimensional axis for fluorescence excitation, emission and intensity.

Contour plot (top down view) of fluorescence EEM

Figure 2. Contour plot (top down view) of fluorescence EEM of fluorescein acquired in one second with the A-TEEM-equipped Duetta.

此處介紹的 Aqualog A-TEEM 化學計量學分析源自 Eigenvector Research Incorporated 的 軟體。

Browse Products

Fast-01
Fast-01

Aqualog A-TEEM Autosampler Accessory

Aqualog - Water Treatment Plant Analyzer
Aqualog - Water Treatment Plant Analyzer

Automated Organic Analysis & Early Warning Sentinel

Duetta
Duetta

Fluorescence and Absorbance Spectrometer

Aqualog - Environmental Water Research Analyzer
Aqualog - Environmental Water Research Analyzer

The Gold Standard for Water CDOM Research

留言諮詢

如您有任何疑問,请在此留下詳細需求或問題,我們將竭誠您服務。

* 這些欄位為必填項目。

Corporate