病毒顆粒由幾個部分組成,包括遺傳物質(DNA 或 RNA)、保護這些基因的蛋白質外殼,以及在某些情況下當蛋白質外殼位於細胞外時包圍蛋白質外殼的脂質包膜。病毒的大小從幾十到幾百奈米不等,相當於其他常見生物體細胞(幾微米到幾十微米)的1/100到1/1000。現在,流感疫苗是透過在受精卵中培養病毒,然後繁殖並使其失去活性來生產的。下圖是流感病毒的電子顯微照片。
Image of an influenza virus.
病毒樣顆粒(VLP)旨在模仿目標病毒除遺傳物質之外的所有部分。由於這種相似性(特別是在構象方面),VLP 在病毒行為研究和疫苗開發中被證明是有用的。 VLP 的大小與病毒的大小相似,可以使用動態光散射或雷射衍射技術進行測量。雷射衍射測量從奈米到數千微米的能力使其非常適合 VLP 開發。根據 VLP 的製造方式,樣品中存在的起始材料片段的尺寸可能大於 VLP 本身。這些顆粒的尺寸可能太大而無法測量動態光散射,或者對該技術的較低分辨率提出了挑戰。
The SZ-100V2 Nanoparticle Analyzer 奈米顆粒分析儀已成功應用於流感病毒、疫苗等透明生物顆粒的分析,且準確度較高。以動態光散射測定的任何生物顆粒的粒徑通常大於電子顯微照片的粒徑。原因是細胞周圍的水合物和蛋白質一起移動,導致顆粒遇到阻力,進而導致 DLS 測量產生更大的顆粒尺寸。
下面的流感病毒結果報告的平均大小為 127.6 nm,具有良好的重複性。測量是在標準玻璃池中以 90 度散射角進行的。
透過 SZ-100 測量的流感病毒的粒徑分佈。
流感病毒的大小結果。
The LA-960V2 Particle Size Analyzer粒度分析儀的測量範圍從 10 奈米到 5 毫米。這足以測量病毒樣顆粒樣本—包括含有大於幾微米材料的顆粒樣本。範例大小結果(如下)顯示了三個不同的群體。最優秀的群體是 VLP 本身。 LA-960 可以使用多模式報告報告整個群體的規模指標以及每個個體群體的指標。
Particle size distribution and results for a VLP material as measured by the LA-960.
表徵病毒或 VLP 的固有困難在於病毒在感染過程中會經歷廣泛的組成和表現變化。它們可以是完整的、片段的,或者它們可以與雜質或聚集體形成複合物。無論您的應用是疫苗製造、治療和顯像劑,還是病毒研究,為了在任何給定樣本集中準確計數和確定病毒或 VLP 顆粒的大小,我們必須考慮整體樣本的多分散性。 ViewSizer 3000 多雷射奈米顆粒追蹤分析儀使用三個同時運行的固態雷射器,具有獨立可調的雷射功率,可有效捕捉整個尺寸範圍的病毒顆粒。
以下是使用 ViewSizer 3000 測量人類病毒載體樣本的結果。粒徑範圍為 50 nm 至 1000 nm,其中 200 nm 左右的顆粒顯著富集。樣本內的總病毒顆粒濃度為 1.6E7 顆粒/mL。注意分佈顯示宿主細胞碎片和聚集體的存在。
Measurement result of a human viral vector sample using the ViewSizer 3000.
HORIBA SZ-100、LA-960 和 ViewSizer 3000 粒度分析儀可以快速且準確地測量病毒和病毒樣顆粒的尺寸。此外,SZ-100 可以測量這些材料的 zeta 電位。
Simultaneous Multi-Laser Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)
Laser Scattering Particle Size Distribution Analyzer
Nanoparticle Analyzer
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